-
Мобильный: +86 182 2619 5994
-
Электронная почта: info@allgrowpeptide.com
Диагностические и аналитические пептиды для научных исследований
Диагностические и аналитические пептиды содействие разработке методов, исследованиям в области иммуноанализа, картированию эпитопов, оценке антител, изучению связывания и созданию аналитических рабочих процессов.
Однако сама по себе последовательность пептида не определяет эффективность анализа.
На конечный результат исследования могут повлиять такие факторы, как чистота, расположение меток, структура терминала, конструкция линкера, метод конъюгации, растворимость и поставляемое количество.
Поэтому компания ALLGROWPEPTIDE рассматривает каждый проект с учетом предполагаемого формата анализа и технических требований.
Пептиды, разработанные с учетом требований анализа
Эффективный пептид для анализа должен соответствовать используемому экспериментальному методу.
Например, для иммобилизованного пептида может потребоваться спейсер, отделяющий последовательность от поверхности матрицы. В то же время для детектирующего пептида может потребоваться флуоресцентная или аффинная метка, расположенная в таком месте, чтобы не блокировать целевую область.
Поэтому перед началом производства необходимо проверить следующие детали:
- целевая последовательность;
- вид или изоформа;
- терминальные группы;
- требуемая чистота;
- формат анализа;
- маркер или конъюгат;
- положение крепления;
- длина линкера;
- требование к растворимости;
- количество в флаконе;
- аналитическая документация.
Исследовательские применения анализируемых пептидов
| Заявка на проведение исследования | Возможный формат пептида | Основные аспекты проектирования |
|---|---|---|
| Разработка метода ИФА | Пептид без маркировки, биотинилированный или конъюгированный с носителем | Раскрытие эпитопов, чистота и особенности нанесения покрытия |
| Картирование эпитопов | Библиотека перекрывающихся пептидов | Покрытие последовательности, перекрытие и формат пластин |
| Оценка антител | Целевой пептид и соответствующая контрольная последовательность | Специфичность и гомология последовательностей |
| Исследования в области переплета | Пептид высокой чистоты с опциональной меткой | Точность нанесения и положение этикетки |
| Разработка ферментных анализов | Пептид-субстрат с флуоресцентной группой или группой-подавителем | Местоположение разреза и конструкция сигнала |
| Исследование калибровочной кривой | Стандартный материал с определённым пептидом | Чистота, состав и стабильность партий |
Разработка методов ИФА и иммуноанализа
Пептиды могут использоваться в иммунологических исследованиях в качестве антигенов, конкурентов, материалов для покрытия, контролей или меченых реагентов для детектирования.
Однако исследователям следует тщательно подбирать последовательность.
Высокогидрофобная последовательность может покрывать поверхность иначе, чем заряженный пептид. Аналогичным образом, метка или белок-носитель могут изменять доступность.
Поэтому в процессе разработки следует учитывать как биологическую мишень, так и физический формат анализа.
В опубликованных компанией GenScript рекомендациях по чистоте проекты по созданию и тестированию антител соотносятся с уровнем чистоты выше 70%, хотя в случаях, когда важны фоновый уровень, специфичность или количественные показатели, может потребоваться более высокая степень чистоты.
Пептиды для картирования эпитопов
Библиотеки пептидов с перекрывающимися участками помогают исследователям изучать, как антитела или партнеры по связыванию реагируют на различные участки более длинной целевой последовательности.
Сначала целевая последовательность разбивается на более короткие пептиды. Затем между соседними последовательностями создается заданное перекрытие. Наконец, пептиды распределяются по отдельным флаконам, пробиркам, планшетам или пулам.
Таким образом, исследователи могут сравнивать ответы по всей последовательности.
Требуемая степень чистоты зависит от конкретного анализа. Например, в опубликованных GenScript рекомендациях по созданию библиотек для некоторых проектов по картированию эпитопов и выявлению биомаркеров указывается использование сырого материала, тогда как варианты с более высокой степенью чистоты применяются в количественных исследованиях или при разработке новых препаратов.
Маркеры, линкеры и конъюгаты
| Изменение | Пример | Возможная цель исследования |
|---|---|---|
| Этикетка «Affinity» | Биотин | Исследования по захвату, иммобилизации или выосаждении |
| Флуоресцентная метка | FAM, FITC, TAMRA, Cy3 или Cy5 | Обнаружение, визуализация или измерение сигнала |
| Конъюгация переносчика | KLH, BSA или OVA | Исследования, связанные с антителами |
| Распорка | Линкер Ahx или PEG | Выделить последовательность из поверхности или метки |
| Реактивная ручка | Группа, совместимая с азидом, алкином, цистеином или малеимидом | Исследования в области контролируемого соединения |
| Маркировка «фермент-субстрат» | Пара флуорофора и гасителя | Разработка методов анализа протеаз или ферментов |
Документация по качеству и аналитике
Аналитический пакет должен соответствовать цели исследования.
Для стандартных проектов ВЭЖХ и масс-спектрометрия могут стать подходящей отправной точкой. Однако в рамках проектов по разработке количественных методов может также потребоваться определение чистого содержания пептида, проверка на наличие противоионов, анализ воды или оценка определённого количества.
| Элемент качества | Цель |
|---|---|
| Анализ с помощью ВЭЖХ | Оценивает хроматографическую чистоту |
| Масс-спектрометрия | Подтверждает молекулярную идентичность |
| Чистое содержание пептидов | Обеспечивает более точное приготовление раствора |
| Подтверждение последовательности | Соответствует предоставленным материалам и утвержденному проекту |
| Идентификация партии | Содержит ссылки на записи об анализе и упаковке пептида |
| Информация об аликвотах | Определяет количество, поставляемое в одном флаконе, пробирке или лунке |
От концепции анализа до доставки пептидов
1. Описать метод анализа
Укажите формат анализа, целевой ген, участок последовательности, требования к мечению, степень очистки и необходимое количество.
2. Анализ структуры пептида
Далее наша команда оценивает длину последовательности, растворимость, степень экспозиции эпитопа, структуру концевых групп и возможные модификации.
3. Подтвердить технические характеристики
Затем подтверждаются последовательность, положение метки, линкер, количество, чистота, результаты тестирования и упаковка.
4. Получить и очистить пептид
Пептид синтезируется в соответствии с утвержденным планом проекта. Затем применяется соответствующая схема очистки.
5. Проведение аналитических испытаний
Оценка партии проводится с помощью ВЭЖХ, масс-спектрометрии и согласованных дополнительных испытаний.
6. Скомпилировать проект
В заключение, пептид поставляется в выбранном формате упаковки: во флаконе, пробирке, планшете, пуле или в индивидуальной упаковке.
Таблица с информацией о проекте
| Обязательные данные | Пример |
|---|---|
| Последовательность | Полная аминокислотная последовательность пептида и целевой участок |
| Тип анализа | ИФА, связывание, фермент, картирование эпитопов или другой метод |
| Изменение | Биотин, флуорофор, носитель или линкер |
| Чистота | Сырая нефть, ≥80%, ≥90%, ≥95% или ≥98% |
| Формат | Отдельный флакон, планшет, пул или набор с несколькими пептидами |
| Документация | COA, ВЭЖХ, МС или дополнительные испытания |
Граница между исследовательским использованием и диагностикой
Пептиды для анализа, предназначенные для научных исследований, не считаются автоматически валидированными продуктами для диагностики in vitro, медицинскими изделиями, клиническими калибраторами или утвержденными диагностическими реагентами.
Поэтому на данной странице не следует утверждать, что продукты ALLGROWPEPTIDE способны диагностировать, предотвращать, контролировать или лечить заболевания, если конкретный конечный продукт не прошел необходимую процедуру регулирования и валидации.
Рекомендуемая формулировка:
Пептиды, описанные на этой странице, поставляются для проведения квалифицированных лабораторных исследований и разработки тестов. Они не являются утвержденными диагностическими средствами и не предназначены для непосредственной клинической диагностики.
Часто задаваемые вопросы
Можете ли вы производить пептиды для разработки метода ИФА?
Индивидуальные пептиды могут оцениваться для использования в исследованиях методами ELISA и иммуноанализа с учетом требований к последовательности, чистоте, мечению, количеству и упаковке.
Можно ли добавить в пептид биотин или флуоресцентный краситель?
Да, перед составлением коммерческого предложения можно ознакомиться с выбранными этикетками и вариантами компоновки линкеров.
Могут ли библиотеки перекрывающихся пептидов использоваться для картирования эпитопов?
Да. Заказчики должны указать целевую последовательность, длину пептида, степень перекрытия, степень очистки и предпочтительный формат.
Какую степень очистки выбрать?
Ответ зависит от чувствительности анализа, допустимого уровня фонового сигнала, требований к концентрации и формата пептида.
Являются ли эти пептиды готовыми диагностическими препаратами?
Нет. Они являются исследовательскими материалами, если не были выполнены отдельные нормативные требования и требования по валидации.
Разработка пептидов для вашего анализа
Укажите целевую последовательность, тип анализа, требуемую степень чистоты, модификацию, количество и формат поставки.
После этого наша команда изучит технические требования и подготовит предложение с учетом особенностей данного проекта.