Услуги по модификации пептидов для специализированных исследований

Модификации пептидов могут вноситься с целью изменения концевого заряда, структуры, аналитической обнаруживаемости, конъюгационных свойств, растворимости, стабильности или экспериментальной совместимости. Определенные изменения концевых групп, флуоресцентные метки, аффинные метки, стратегии циклизации, линкеры, цепи ПЭГ, липидные группы и нестандартные аминокислоты могут быть предоставлены после оценки возможности реализации данной последовательности.

Услуги по модификации пептидов

Зачем модифицируют пептиды?

Стандартный линейный пептид может не обладать всеми свойствами, необходимыми для проведения конкретного эксперимента. Поэтому в него может быть введена функциональная группа, чтобы пептид можно было обнаружить, иммобилизовать, конъюгировать, циклизировать, стабилизировать или дифференцировать аналитическим способом.

Однако каждая присоединенная группа изменяет молекулярную структуру. Вследствие этого могут также изменяться молекулярная масса, гидрофобность, заряд, растворимость, особенности очистки и аналитическая чувствительность.

Компании Bachem и GenScript перечисляют среди коммерчески доступных вариантов такие модификации, как ацетилирование, амидирование, биотинилирование, маркировка флуоресцентными красителями, циклизация, ПЭГилирование, «клик-химические» группы, фосфорилирование, липидирование, изотопная маркировка и конъюгация с носителем.

Категории модификаций

Модификации терминала

Можно рассмотреть N-концевую ацетилирование, C-концевую амидирование, присоединение концевой жирной кислоты, а также отдельные концевые группы.

Флуоресцентные и аффинные метки

Можно ввести биотин, FAM, FITC, TAMRA, родамин или другие метители на носителе.

Конструктивные изменения

Могут оцениваться циклизация дисульфидных связей, циклизация по принципу «голова-хвост», циклизация боковых цепей или структуры с ограничениями.

Химические модификации

Можно рассмотреть такие методы, как фосфорилирование, метилирование, ПЭГилирование, липидирование, изотопное мечение, D-аминокислоты и не природные аминокислоты.

Реактивные группы и связующие звенья

Могут быть включены азид, алкин, малеимид, цистеиновые группы, Ahx и другие спейсеры.

Конъюгация переносчика

В соответствующих случаях можно использовать KLH, BSA, OVA или другой технически подходящий носитель.

Руководство по выбору модификаций

Цель исследованияВозможные изменения
Снизить плату за обслуживание терминалаАцетилирование или амидирование
Включить детектирование флуоресценцииFAM, FITC, TAMRA или другой краситель
Поддержка аффинного захватаСтруктура биотина или биотин-линкер
Включить привязку к операторуКонъюгация с цистеином, линкером или носителем
Управление конформацией пептидаЦиклизация
Увеличить гидродинамический размерПЭГилирование
Усилить связывание с мембранойЛипидизация
Поддержка аналитического отслеживанияМечение стабильными изотопами
Включить «химию одного нажатия»Азидная или алкиновая группа

Как осуществляется управление проектом по созданию модифицированных пептидов?

Определена цель исследования

Сначала объясняется, какую функцию должна выполнять модификация, например, обнаружение, конъюгация, контроль структуры, растворимость или аналитическое отслеживание.

Выбрано положение крепления

Затем выбирается N-конец, C-конец или указанная боковая цепь.

Пересмотрены требования к линкеру

При необходимости можно добавить прокладку, чтобы уменьшить стерическое взаимодействие между пептидом и присоединенной группой.

Проводится оценка осуществимости

Далее рассматриваются последствия модификации для заряда, гидрофобности, выхода синтеза, растворимости и очистки.

Выбор аналитических методов

В зависимости от модифицированной структуры можно выбрать ВЭЖХ, МС, УФ-детектирование, анализ аминокислот или другой согласованный метод.

Окончательная спецификация утверждена

В заключение подтверждаются последовательность, модификация, положение, линкер, степень очистки, количество и набор аналитических методов.

Обсудите свой проект модифицированного пептида

Укажите последовательность, модификацию, место присоединения, требования к линкеру, степень очистки, количество и область применения в научных исследованиях.

CTA